胺轉(zhuǎn)氨酶AcATA突變體及其在制備西他列汀中間體中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010275136.9 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN111549008B 公開(kāi)（公告）日 2021-07-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN111549008B 申請(qǐng)公布日 2021-07-23
分類號(hào) C12N9/10（2006.01）I;C12N15/54（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N1/21（2006.01）I;C12P17/12（2006.01）I;C12R1/19（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 柳志強(qiáng);程峰;李明友;張曉健;賈東旭;鄭裕國(guó);何人寶;金逸中;林嬌華 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 浙江永太藥業(yè)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州之江專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 牛世靜
地址 310014浙江省杭州市下城區(qū)潮王路18號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種胺轉(zhuǎn)氨酶AcATA突變體及其在制備西他列汀中間體中的應(yīng)用，該胺轉(zhuǎn)氨酶AcATA突變體由SEQ ID No.2所示氨基酸序列的第122位進(jìn)行單突變獲得；其中，第122位的甲硫氨酸突變成組氨酸、纈氨酸或苯丙氨酸。本發(fā)明通過(guò)分子對(duì)接和同源建模等方法獲得可能影響其催化活性的位點(diǎn)，并進(jìn)行了定點(diǎn)突變，最終得到的胺轉(zhuǎn)氨酶AcATA突變體不僅具有較高的酶活，酶活均高于460U/g，均是野生型的4倍以上；而且能夠高效催化西他列汀中間體前體酮1?哌啶?4?（2,4,5?三氟苯基）?1,3?二丁酮合成西他列汀中間體（R）?3?氨基?1?哌啶?4?（2,4,5?三氟苯基）?1?丁酮，24h轉(zhuǎn)化率高達(dá)90％。