一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測(cè)序檢測(cè)耳聾易感基因突變的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811642909.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109777867A 公開（公告）日 2019-05-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN109777867A 申請(qǐng)公布日 2019-05-21
分類號(hào) C12Q1/6883（2018.01）I; C12Q1/6858（2018.01）I; C12N15/11（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭焱; 盧炫廷; 邱美蘭; 謝龍旭; 邱雪蓮; 吳丹葉; 徐愛娟 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司; 廣州凱普醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司; 廣州凱普生物科技有限公司
地址 510000 廣東省廣州市黃埔區(qū)九龍鎮(zhèn)中新知識(shí)城鳳凰三橫路71號(hào)2號(hào)試劑車間四樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測(cè)序檢測(cè)耳聾易感基因突變的方法，本方法基于一個(gè)用于擴(kuò)增GJB2基因、SLC26A4基因、線粒體DNA和GJB3基因耳聾相關(guān)突變位點(diǎn)的引物組合，其核苷酸序列如SEQ ID No.1～26所示。通過本發(fā)明建立的檢測(cè)方法，利用重疊延伸PCR結(jié)合Sanger測(cè)序檢測(cè)耳聾易感基因，僅需要5個(gè)PCR反應(yīng)和測(cè)序反應(yīng)，大幅度減少PCR反應(yīng)數(shù)和測(cè)序反應(yīng)數(shù)，可以檢測(cè)GJB2基因、SLC26A4基因、線粒體DNA和GJB3基因的主要43個(gè)突變位點(diǎn)，并可以發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增片度中新的變異位點(diǎn)。所以此檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于耳聾易感基因突變檢測(cè)具有重要的臨床意義，不僅簡(jiǎn)化操作步驟，降低檢測(cè)成本，而且提高檢測(cè)效率，值得大力推廣。