一種利用紅色熒光蛋白用做水稻轉化篩選標記的轉化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201010563552.5 申請日 -
公開（公告）號 CN102199619B 公開（公告）日 2013-05-15
申請公布號 CN102199619B 申請公布日 2013-05-15
分類號 C12N15/82(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄧興旺;王海洋;萬向元;周君莉 申請（專利權）人 北京凱拓迪恩生物技術研發(fā)中心有限責任公司
代理機構 - 代理人 -
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地西路39號北大生物城
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種利用紅色熒光蛋白做篩選標記的轉化方法。我們合成了FP基因并根據水稻密碼子偏好性進行了修改，用它作為水稻轉化和植株再生的篩選標記基因。FP基因由愈傷組織/種皮特異啟動子驅動，并與目的基因緊密連接，由農桿菌介導轉入水稻胚性愈傷。在共培養(yǎng)后的30天內利用熒光顯微鏡進行三次篩選。獲得的轉基因苗利用PCR以及Southern雜交進一步驗證，結果表明，轉基因苗陽性率高達80%，證明了FP作為植物轉化的篩選標記是完全可行的。本發(fā)明有效降低了傳統(tǒng)篩選標記如抗生素和除草劑抗性基因對環(huán)境和食品安全的潛在危害，是一種新型的安全的植物遺傳轉化篩選系統(tǒng)。