一種殺傷活性增強的NK細胞及其制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811586110.5 申請日 -
公開（公告）號 CN109666639A 公開（公告）日 2019-04-23
申請公布號 CN109666639A 申請公布日 2019-04-23
分類號 C12N5/0783（2010.01）I; C12N5/078（2010.01）I; C12N13/00（2006.01）I; A61K35/17（2015.01）I; A61P35/00（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 方維佳; 彭富強; 許震宇; 鄭怡; 涂曉璇; 謝信飛 申請（專利權(quán)）人 浙江生創(chuàng)精準醫(yī)療科技有限公司
代理機構(gòu) 北京三高永信知識產(chǎn)權(quán)代理有限責任公司 代理人 邢惠童
地址 310058 浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路866號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種殺傷活性增強的NK細胞及其制備方法，所述方法包括：a.從外周血單個核細胞PBMC制備飼養(yǎng)細胞，和b.NK細胞擴增，所述步驟a是PBMC用CD3單抗進行初步刺激后，在含有IL?2、IFN?r、IL?15和IL?18的第一培養(yǎng)基中繼續(xù)激活，獲得抗原呈遞的初步激活的PBMC，將上述激活的PBMC用γ?射線進行輻照后作為飼養(yǎng)細胞，并將部分飼養(yǎng)細胞液氮凍存；所述步驟b是將未經(jīng)上述激活的原始PBMC或通過免疫磁珠分選法去除CD3+T淋巴細胞并可選地再次富集CD56+后的NK細胞與未經(jīng)液氮凍存處理的飼養(yǎng)細胞混合孵育，在含有IL?2、IL?15、OK432和煙酰胺的第二培養(yǎng)基中進行NK細胞的擴增培養(yǎng)，然后轉(zhuǎn)為添加含有IL?2、煙酰胺的第三培養(yǎng)基擴增培養(yǎng)，之后繼續(xù)添加從液氮凍存復蘇的飼養(yǎng)細胞，繼續(xù)擴增培養(yǎng)。