一種基因編輯單細(xì)胞的快速篩選方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110845483.5 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113584127A 公開(kāi)（公告）日 2021-11-02
申請(qǐng)公布號(hào) CN113584127A 申請(qǐng)公布日 2021-11-02
分類(lèi)號(hào) C12Q1/6806（2018.01）I;C12Q1/686（2018.01）I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 石宏;邱志超;翟平生 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 云南聚云基因工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京酷愛(ài)智慧知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 劉志剛
地址 650106云南省昆明市高新區(qū)科高路新光巷285號(hào)沃霖大廈第七層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種基因編輯單細(xì)胞的快速篩選方法，包括將單一細(xì)胞于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，取出部分細(xì)胞懸液置于96孔PCR板中；將96孔PCR板進(jìn)行密封、離心、靜置、再離心，采用96孔吸液板吸去上清液；在去除上清液的96孔PCR板中加入PH為8.0的1xTE buffer緩沖液，密封96孔PCR板后，于95℃下處理8～12min，再進(jìn)行離心處理，收集上清，即得細(xì)胞基因組DNA；以細(xì)胞基因組DNA為模板擴(kuò)增包含基因編輯位點(diǎn)的基因片段，再進(jìn)行測(cè)序，根據(jù)測(cè)序結(jié)果確認(rèn)基因編輯的單細(xì)胞；該方法將96孔培養(yǎng)板中的細(xì)胞一一對(duì)應(yīng)96孔PCR板，再經(jīng)DNA提取后直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，該方法操作簡(jiǎn)單、省時(shí)省力，并且避免了人為編板號(hào)錯(cuò)誤的問(wèn)題。