一種基于等溫擴(kuò)增的miRNA多位點(diǎn)聯(lián)合檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011405012.4 申請日 -
公開（公告）號 CN112430643A 公開（公告）日 2021-03-02
申請公布號 CN112430643A 申請公布日 2021-03-02
分類號 C12Q1/6844(2018.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙輝;高蕾 申請（專利權(quán)）人 昂凱生命科技（蘇州）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州中合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 劉召民
地址 215000江蘇省蘇州市高新區(qū)錦峰路8號醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)園12棟301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種基于等溫擴(kuò)增的miRNA多位點(diǎn)聯(lián)合檢測方法，主要包括以下步驟：1)針對每個目的miRNA序列設(shè)計合成一條特異性單鏈DNA探針，鎖式探針與相對應(yīng)的待檢測miRNA片段進(jìn)行雜交，形成多個雜化雙鏈；2)連接步驟1)雜交成功的鎖式探針的兩端；3)對步驟2)連接產(chǎn)物進(jìn)行滾環(huán)等溫擴(kuò)增；4)使用特異性磁珠對步驟3)產(chǎn)物片段進(jìn)行雜交；5)使用鏈霉親和標(biāo)記的熒光染料對步驟4)產(chǎn)物進(jìn)行熒光標(biāo)記；6)檢測步驟5)產(chǎn)物熒光信號。本發(fā)明無需進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，節(jié)省成本，降低損失；特異性好，可區(qū)分單個堿基；多重檢測；可應(yīng)用于各領(lǐng)域多位點(diǎn)miRNA的定量檢測，包括但不限于癌癥篩查、疾病診斷、科學(xué)研究等。??