一種多基因甲基化聯(lián)合檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911146574.9 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN110923302A 公開(公告)日 2020-03-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN110923302A 申請(qǐng)公布日 2020-03-27
分類號(hào) C12Q1/686;C12Q1/682 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 趙輝;陳晨;肇源 申請(qǐng)(專利權(quán))人 昂凱生命科技(蘇州)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京智客聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 代理人 昂凱生命科技(蘇州)有限公司
地址 215002 江蘇省蘇州市高新區(qū)錦峰路8號(hào)2號(hào)樓411-3室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于核酸測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種多基因甲基化聯(lián)合檢測(cè)方法。本發(fā)明針對(duì)多個(gè)目標(biāo)基因甲基化區(qū)域,在經(jīng)重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化后的DNA序列上設(shè)計(jì)兩組PCR引物。使用第一組引物進(jìn)行一輪PCR后,產(chǎn)物經(jīng)純化后使用第二組引物進(jìn)行二輪PCR,所得產(chǎn)物與雜交磁珠雜交并進(jìn)行熒光標(biāo)記,最后使用液相芯片平臺(tái)檢測(cè)。本發(fā)明采用多對(duì)引物同時(shí)進(jìn)行PCR反應(yīng),通過(guò)檢測(cè)偶聯(lián)不同標(biāo)簽序列的磁珠的熒光信號(hào)來(lái)確定不同基因位點(diǎn)的甲基化情況,實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)的目的。兩次PCR擴(kuò)增實(shí)現(xiàn)了甲基化信號(hào)的逐級(jí)放大,提高了檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性,使樣本的適用范圍更加廣泛。