一種通過原生質(zhì)體快速驗(yàn)證啟動(dòng)子強(qiáng)弱的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610837885.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN106755057B 公開（公告）日 2020-05-05
申請(qǐng)公布號(hào) CN106755057B 申請(qǐng)公布日 2020-05-05
分類號(hào) C12N15/82;G01N21/64 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李陽(yáng);孫智光 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢伯遠(yuǎn)生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 馮子玲
地址 430079 湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)樓B1棟（B8-5）
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提出了一種通過原生質(zhì)體快速驗(yàn)證啟動(dòng)子強(qiáng)弱的方法，通過在同一個(gè)載體上用目標(biāo)啟動(dòng)子和參考啟動(dòng)子分別驅(qū)動(dòng)同一種熒光蛋白，在同一個(gè)細(xì)胞中表達(dá)，但是分別定位在不同的亞細(xì)胞位置，然后再利用同一個(gè)激光束激發(fā)熒光蛋白，此種情況下所有的其他參數(shù)都是一致的情況下，不同的亞細(xì)胞位置上的熒光亮度就可以代表啟動(dòng)子的強(qiáng)度，通過與參考啟動(dòng)子比較可以定量分析出目標(biāo)啟動(dòng)子與參考啟動(dòng)子的倍比關(guān)系。本發(fā)明只需構(gòu)建一次插入了待驗(yàn)證啟動(dòng)子序列的載體，然后用構(gòu)建好的載體轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體再在激光共聚焦顯微鏡下觀察拍照通過比較對(duì)照啟動(dòng)子產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度和需驗(yàn)證的啟動(dòng)子產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度的方式快速評(píng)價(jià)啟動(dòng)子活性的強(qiáng)弱。