一種生產(chǎn)重組堿性蛋白酶的基因工程菌及其構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910332240.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN110106128B 公開(kāi)(公告)日 2021-08-17
申請(qǐng)公布號(hào) CN110106128B 申請(qǐng)公布日 2021-08-17
分類(lèi)號(hào) C12N1/21;C12N15/57;C12N15/75;C12N9/54;C12R1/07 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李玉;路福平;王興吉;史超碩;劉逸寒;彭沖;劉夫鋒;張會(huì)圖;王洪彬 申請(qǐng)(專利權(quán))人 山東隆科特酶制劑有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京瑞盛銘杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 郭曉迪
地址 300457 天津市濱海新區(qū)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)第十三大街29號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種生產(chǎn)重組堿性蛋白酶的基因工程菌,是利用核苷酸序列如SEQIDNO:1所示的啟動(dòng)子與信號(hào)肽組合與克勞氏芽孢桿菌堿性蛋白酶基因aprE構(gòu)建重組表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)入枯草芽孢桿菌宿主WB600中,最終電轉(zhuǎn)到解淀粉芽孢桿菌CGMCCNo.11218中,獲得重組基因工程菌。利用該基因工程菌發(fā)酵生產(chǎn)的重組堿性蛋白酶的搖瓶發(fā)酵活力達(dá)到18000U/mL,是原始啟動(dòng)子P43和信號(hào)肽SPSacB組合的2.52倍,在5L罐放大實(shí)驗(yàn),該重組菌株酶活達(dá)到58000U/mL,為實(shí)現(xiàn)堿性蛋白酶的工業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。