新型基因打靶方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510220631.9 申請日 -
公開（公告）號 CN106191041A 公開（公告）日 2016-12-07
申請公布號 CN106191041A 申請公布日 2016-12-07
分類號 C12N15/11(2006.01)I;C12N1/16(2006.01)I;C12P21/00(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姜有為;李云飛 申請（專利權(quán)）人 杭州菁因康生物科技有限公司
代理機構(gòu) 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 杭州菁因康生物科技有限公司
地址 311121 浙江省杭州市余杭區(qū)文一西路1500號1幢524室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種新型的兩步基因打靶方法以及用于基因打靶的核苷酸構(gòu)建物，所述方法能提高基因打靶效率和精確鑒定靶基因敲除株。本發(fā)明方法包括首先通過同源重組用打靶盒高效替換基因組中的靶基因，所述打靶盒由靶基因活性變異體、標(biāo)記基因和位點特異性重組位點構(gòu)成。然后通過重組酶切除打靶盒，在靶基因上留下一個位點特異性重組位點而產(chǎn)生靶基因敲除株。本發(fā)明還包括利用重組酶表達載體中的反選擇標(biāo)記除去敲除株中的重組酶表達載體。本發(fā)明方法可以利用所有機體細(xì)胞中內(nèi)源性的同源重組過程，因此，可以用于改造機體的任何基因。