一種Micro RNA表達(dá)檢測方法及其定量檢測試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310036690.1 申請日 -
公開（公告）號 CN103205489B 公開（公告）日 2016-03-09
申請公布號 CN103205489B 申請公布日 2016-03-09
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姚遠(yuǎn)颋;王海峰;費倩嵐;談竹君;勞昕元 申請（專利權(quán)）人 上海尤里卡信息科技有限公司
代理機構(gòu) 上海弼興律師事務(wù)所 代理人 朱水平;沈利
地址 200233 上海市徐匯區(qū)桂平路333號6號樓306室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種Micro?RNA表達(dá)檢測方法及其定量檢測試劑盒。該方法包括：（1）提取樣品的Micro?RNA，將該Micro?RNA連接PolyA尾巴；（2）將三條具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的引物混合后退火處理，（3）將連有PolyA尾巴的Micro?RNA與具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的引物退火連接，（4）以該Micro?RNA為模板反轉(zhuǎn)錄得到cDNA，（5）以該cDNA為模板，加入擴增目標(biāo)Micro?RNA的引物，通過熒光定量PCR方法檢測目標(biāo)Micro?RNA表達(dá)。所述方法通過一次反轉(zhuǎn)錄可得到待測對象所有的Micro?RNA及內(nèi)參基因，大大降低了引物二聚體以及復(fù)雜發(fā)卡結(jié)構(gòu)的生成，大幅度提高了對Micro?RNA的檢測效率。