一種己糖激酶的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111319332.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113846072A 公開（公告）日 2021-12-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN113846072A 申請(qǐng)公布日 2021-12-28
分類號(hào) C12N9/12（2006.01）I;C12N15/70（2006.01）I;C12N15/66（2006.01）I;C12N15/62（2006.01）I;C07K19/00（2006.01）I;C07K1/22（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 羅漫杰;宮安;王梁;施婧妮;徐燦;彭晶 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢瀚海新酶生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海旭誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 鄭立
地址 430000湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國家生物產(chǎn)業(yè)（九峰創(chuàng)新）基地B5棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種己糖激酶表達(dá)及純化方法，包括己糖激酶基因的克隆與分子構(gòu)建、重組表達(dá)菌株的構(gòu)建、重組己糖激酶的誘導(dǎo)表達(dá)、純化與活力檢測(cè)方法和己糖激酶高密度發(fā)酵放大等步驟。本發(fā)明第一次從釀酒酵母中克隆己糖激酶基因重組在大腸桿菌中表達(dá)，大大的提高了蛋白表達(dá)量和降低了蛋白純化的難度，極大地簡(jiǎn)化了己糖激酶生產(chǎn)工藝；在實(shí)現(xiàn)己糖激酶的高效穩(wěn)定表達(dá)的同時(shí)，通過優(yōu)化誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)劑濃度、和誘導(dǎo)添加Mg2+濃度等提高了己糖激酶的蛋白比活力。