翻譯組RNC-mRNAs文庫(kù)構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610534365.1 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN106434625B 公開(kāi)（公告）日 2020-12-11
申請(qǐng)公布號(hào) CN106434625B 申請(qǐng)公布日 2020-12-11
分類號(hào) C12N15/10;C12Q1/6806;C40B50/06 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 伍泳彰;曾宏彬;陳杰 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣州賽哲生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州圣理華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 頓海舟;李唐明
地址 510300 廣東省廣州市國(guó)際生物島螺旋四路一號(hào)研發(fā)A區(qū)第三層304-305
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種翻譯組RNC?mRNAs文庫(kù)構(gòu)建方法。該構(gòu)建方法包括RNC?mRNAs和mRNA準(zhǔn)備，合成雙鏈cDNA，RNC?mRNAs和mRNA文庫(kù)構(gòu)建，數(shù)據(jù)質(zhì)控與分析。本發(fā)明的方法在RNC捕獲上，采用了先進(jìn)的Beckman MAX?TL超速離心平臺(tái)，在cDNA合成和文庫(kù)構(gòu)建上，首先采用金屬離子高溫物理法對(duì)RNA片段化，后續(xù)才進(jìn)行cDNA合成、末端修復(fù)和磁珠片段選擇，增加RNC?mRNAs信息的完整性、均一性，雙引物逆轉(zhuǎn)錄法，此法大大提高了酶的效率，保證全長(zhǎng)擴(kuò)增的完整。在6個(gè)小時(shí)內(nèi)，可以實(shí)現(xiàn)從RNC捕獲到翻譯組文庫(kù)構(gòu)建整套流程。