單鏈測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811306568.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN109536579A 公開(kāi)（公告）日 2019-03-29
申請(qǐng)公布號(hào) CN109536579A 申請(qǐng)公布日 2019-03-29
分類號(hào) C12Q1/6806（2018.01）I; C12Q1/6869（2018.01）I; C40B50/06（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張巨永; 盧瀚林 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市艾斯基因科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州高炬知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 董博
地址 518000 廣東省深圳市龍崗區(qū)布吉街道布吉廣場(chǎng)B座923
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了提供了高通量測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及其應(yīng)用。其中，構(gòu)建高通量測(cè)序文庫(kù)的方法包括：將基因組DNA片段化和末端修復(fù)的DNA片段的3’末端添加堿基A，連接接頭并擴(kuò)增后，將所述DNA文庫(kù)用外切酶進(jìn)行消化得到單鏈DNA文庫(kù)；利用特異性探針對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行雜交捕獲，以便獲得目的片段。本發(fā)明改進(jìn)DNA雜交流程，將常規(guī)雙鏈DNA模板通過(guò)酶切消化成單鏈，再采用環(huán)狀寡核苷酸的完全封閉引入的接頭和標(biāo)簽序列，用探針(RNA或DNA)對(duì)單鏈DNA模板進(jìn)行捕獲，可以降低雜交捕獲的時(shí)間，提高探針捕獲目的DNA序列的效率，降低GC區(qū)域捕獲的偏好性。