人胚腎293細(xì)胞亞克隆細(xì)胞株

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN03126889.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN100427590C 公開(kāi)（公告）日 2008-10-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN100427590C 申請(qǐng)公布日 2008-10-22
分類號(hào) C12N5/10(2006.01);C12N15/11(2006.01);C12N15/53(2006.01);C12N9/02(2006.01) 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張曉志;彭朝暉 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市賽百諾基因技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 張曉志;彭朝暉;深圳市賽百諾基因技術(shù)有限公司
地址 518057廣東省深圳市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)園（北區(qū)）郎山路賽百諾公司
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 一種用于生產(chǎn)重組腺病毒制品的人胚腎293細(xì)胞亞克隆細(xì)胞株，該細(xì)胞株是由ATCC 293細(xì)胞經(jīng)亞克隆方法制得，它含有人三磷酸甘油醛脫氫(human glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase，GAPD)，該細(xì)胞株由下列方法培養(yǎng)制得：a、將ATCC293細(xì)胞(P32)復(fù)蘇后進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增傳代至第33代次(P33)，然后將P33細(xì)胞懸液用FACS流式細(xì)胞儀進(jìn)行亞克隆；b、用2個(gè)96孔板，每孔中0.2ml培養(yǎng)基中放置一個(gè)細(xì)胞，在36～38℃、3～6％CO2條件下培養(yǎng)6～10天；c、挑選出細(xì)胞形態(tài)均一、生長(zhǎng)良好的、已達(dá)到不低于60％鋪滿生長(zhǎng)的克??；d、重復(fù)上述步驟四次，最后挑選出1個(gè)亞克隆的細(xì)胞柱(P37)，繼續(xù)培養(yǎng)擴(kuò)增并制成原代細(xì)胞庫(kù)(P38)，置于-80℃凍存；e、以原代細(xì)胞庫(kù)(P38)為基礎(chǔ)制備主代細(xì)胞庫(kù)及工作細(xì)胞庫(kù)。本發(fā)明應(yīng)用基因工程技術(shù)和分子克隆技術(shù)，使其具有明顯增強(qiáng)細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)的功能和細(xì)胞生長(zhǎng)倍增時(shí)間短的優(yōu)點(diǎn)。