體外檢測MUSK-Ab和LRP4-Ab的方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810989134.9 申請日 -
公開（公告）號 CN108931513B 公開（公告）日 2021-11-19
申請公布號 CN108931513B 申請公布日 2021-11-19
分類號 G01N21/64（2006.01）I;G01N33/68（2006.01）I 分類 測量；測試;
發(fā)明人 高峰;韓姣姣;李明強(qiáng);張迎娜;張婧;趙雪;呂杰;方華 申請（專利權(quán)）人 河南省醫(yī)藥科學(xué)研究院
代理機(jī)構(gòu) 無錫市匯誠永信專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 張歡勇
地址 450000河南省鄭州市二七區(qū)大學(xué)路40號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種體外檢測MUSK?Ab和LRP4?Ab的方法及試劑盒。該方法包括以下步驟：取293T細(xì)胞，將293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染pCMV6?AC?GFP?MuSK重組質(zhì)粒和/或pCMV6?AC?GFP?LRP4重組質(zhì)粒；向轉(zhuǎn)染pCMV6?AC?GFP?MuSK重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染細(xì)胞和/或轉(zhuǎn)染pCMV6?AC?GFP?LRP4重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染細(xì)胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸鹽緩沖液洗滌之后添加牛血清白蛋白和TritonX?100進(jìn)行封閉、通透2～3h；取待測血清，添加封閉、通透后的pCMV6?AC?GFP?MuSK重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染細(xì)胞和/或封閉、通透的pCMV6?AC?GFP?LRP4重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸鹽緩沖液洗滌之后加入Alexa Fluor568標(biāo)記的羊抗人IgG，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸鹽緩沖液洗滌后使用熒光顯微鏡的藍(lán)色激發(fā)光和綠色激發(fā)光激發(fā)，觀察并拍照記錄。所使用試劑均為常規(guī)試劑，不需要依賴價格昂貴的試劑盒，檢測成本較低。