一種檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910056472.1 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN109797437A 公開(kāi)（公告）日 2019-05-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN109797437A 申請(qǐng)公布日 2019-05-24
分類號(hào) C40B50/06（2006.01）I; C12Q1/6806（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 周騁 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京愛(ài)普益生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京知呱呱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京愛(ài)普益生物科技有限公司
地址 100176 北京市大興區(qū)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)地盛東路1號(hào)愛(ài)普益大廈5層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)測(cè)序文庫(kù)的構(gòu)建方法及其應(yīng)用，該構(gòu)建方法包括：步驟一、根據(jù)基因組DNA序列分別設(shè)計(jì)上游引物和下游引物；步驟二、在每條上游引物上添加A接頭和第一標(biāo)簽，得到上游融合引物，在每條下游引物上添加P接頭和第二標(biāo)簽，得到下游融合引物，并將上游融合引物與下游融合引物混合得到混合融合引物；步驟三、將混合融合引物、基因組DNA、含有Mg2+，dNTPs，Taq酶的Tris?HCl緩沖液和無(wú)核酸酶水配制成多重PCR反應(yīng)體系；步驟四、將得到的多重PCR反應(yīng)體系進(jìn)行PCR反應(yīng)、純化得到多樣品測(cè)序文庫(kù)；本發(fā)明構(gòu)建方法通過(guò)上下游引物上不同標(biāo)簽組合識(shí)別樣品，能夠大大降低引物合成量，此外，還能夠減少擴(kuò)增次數(shù)，有效降低樣品間的數(shù)據(jù)不均衡。