利用熒光定量PCR檢測人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑中真菌的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111610623.7 申請日 -
公開（公告）號 CN114277105A 公開（公告）日 2022-04-05
申請公布號 CN114277105A 申請公布日 2022-04-05
分類號 C12Q1/6851（2018.01）I;C12Q1/6895（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陸曉;張春娟;張萬山;馬進(jìn) 申請（專利權(quán)）人 江蘇拓弘康恒醫(yī)藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京佰騰智信知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 黃杭飛
地址 211000江蘇省南京市江寧區(qū)東山街道永勝路66號2幢
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請公開利用熒光定量PCR檢測人源臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞制劑中真菌的方法，屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體包括如下步驟：（1）將人源間充質(zhì)干細(xì)胞制品進(jìn)行離心棄上清后，向沉淀中加入裂解液重懸并轉(zhuǎn)移至裂解管中進(jìn)行研磨，對真菌進(jìn)行破碎后，提取純化獲得真菌DNA；（2）對樣本DNA進(jìn)行熒光定量PCR檢測；（3）通過Ct值判斷樣本的結(jié)果。由于真菌的28SrRNA具有一定的保守性，保守區(qū)序列是大部分真菌所共有的；通過設(shè)計(jì)28srRNA的特異性上游引物、下游引物及熒光探針，采用熒光探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)可提高檢測的特異性并且能大大縮短檢測時(shí)間。