一種工程菌株的構(gòu)建方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811588976.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109652353A 公開（公告）日 2019-04-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN109652353A 申請(qǐng)公布日 2019-04-19
分類號(hào) C12N1/21（2006.01）I; C12N15/29（2006.01）I; C12N15/74（2006.01）I; C12N15/66（2006.01）I; C12N15/65（2006.01）I; C12R1/01（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 米鐵柱; 張國(guó)棟; 劉佳音; 鄒丹丹; 徐春瑩; 修旺珊; 孫艷君 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 青島袁策集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京華仁聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 青島袁策集團(tuán)有限公司
地址 266000 山東省青島市李滄區(qū)金水路171號(hào)青島國(guó)際院士港16號(hào)樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請(qǐng)公開了一種工程菌株的構(gòu)建方法，包括以下步驟：A、用提取待轉(zhuǎn)化植物的DNA；B、分別獲得DsRed基因、EAT1基因、ZmAA基因三種連鎖基因表達(dá)盒；C、去除Hpt基因的pCAMBIA1300質(zhì)粒的獲??；D、各個(gè)表達(dá)盒的連接；E、融合片段與pCAMBIA1300?hpt?質(zhì)粒的連接。F、導(dǎo)入到農(nóng)桿菌中，形成能夠用于介導(dǎo)轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞的工程菌農(nóng)桿菌。本發(fā)明工程菌株的構(gòu)建方法，構(gòu)建了雙T?DNA載體，其中一個(gè)T?DNA區(qū)含有上述的三連鎖基因，另一個(gè)T?DNA區(qū)含有潮霉素或者卡那霉素等抗性基因，用于愈傷轉(zhuǎn)化及植株再生階段的篩選。