一種雙標(biāo)法檢測精子線粒體膜電位和活性氧的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010145558.4 申請日 -
公開（公告）號 CN111289424A 公開（公告）日 2020-06-16
申請公布號 CN111289424A 申請公布日 2020-06-16
分類號 G01N15/14(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 -
發(fā)明人 曾橋;胡西陵 申請（專利權(quán)）人 浙江星博生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 寧波高新區(qū)核心力專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 浙江星博生物科技股份有限公司
地址 浙江省寧波市高新區(qū)新暉路139號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種雙標(biāo)法檢測精子線粒體膜電位和活性氧的方法，特點(diǎn)是包括待精液自然液化后，取5?10萬條精子加入到37℃預(yù)熱的500μL精子培養(yǎng)緩沖液中混勻，并置于37℃水浴箱中加入10uL精子線粒體膜電位和活性氧聯(lián)合染液，混勻37℃避光孵育，5?30分鐘內(nèi)上流式細(xì)胞儀機(jī)檢測的步驟；最后分別收集三種顏色熒光信號：綠色、橙色和紅色；采用流式細(xì)胞儀自帶軟件分析結(jié)果，根據(jù)綠色和橙色熒光情況，確定線粒體膜電位高低；根據(jù)紅色熒光情況，確定活性氧含量情況，優(yōu)點(diǎn)是實(shí)現(xiàn)了一次性完成精子線粒體膜電位和活性氧的檢測，且操作簡單、快速、重復(fù)性好。??