一種在多重PCR體系內(nèi)加入內(nèi)參定量核酸拷貝數(shù)的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911152307.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN110724731A 公開(kāi)(公告)日 2020-01-24
申請(qǐng)公布號(hào) CN110724731A 申請(qǐng)公布日 2020-01-24
分類號(hào) C12Q1/6851 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 浦浩;黃文潘;張亞楠;李陽(yáng) 申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海冰緣醫(yī)療科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京睿智保誠(chéng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 上海冰緣醫(yī)療科技有限公司
地址 201800 上海市嘉定區(qū)葉城路1288號(hào)6幢J
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種在多重PCR體系內(nèi)加入內(nèi)參定量核酸拷貝數(shù)的方法,屬于核酸分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域;所述方法,包括以下步驟:1)構(gòu)建內(nèi)參和目標(biāo)基因擴(kuò)增效率系數(shù)訓(xùn)練集,獲得內(nèi)參與目標(biāo)基因擴(kuò)增系數(shù)之間的關(guān)系;2)在目標(biāo)基因的多重PCR體系中添加確定拷貝數(shù)的內(nèi)參以及擴(kuò)增內(nèi)參的引物后,進(jìn)行兩輪多重PCR擴(kuò)增后獲得測(cè)序文庫(kù);3)對(duì)所述測(cè)序文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序,獲得測(cè)序數(shù)據(jù);4)分析所述測(cè)序數(shù)據(jù)獲得內(nèi)參和目標(biāo)基因的reads數(shù),利用步驟1)中獲得的內(nèi)參與目標(biāo)基因擴(kuò)增效率系數(shù)之間的關(guān)系,計(jì)算目標(biāo)基因的拷貝數(shù)。本發(fā)明所述方法能夠快速的定量樣品中特定核酸基因的拷貝數(shù),準(zhǔn)確度高。