一種用于甲基化擴(kuò)增子測序的建庫方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010835374.0 申請日 -
公開(公告)號 CN112126987A 公開(公告)日 2020-12-25
申請公布號 CN112126987A 申請公布日 2020-12-25
分類號 C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/6858(2018.01)I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 王俊;李小花;劉朝煜;姚旭梅 申請(專利權(quán))人 深圳思凝一云科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京中南長風(fēng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 鄭海
地址 518101廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)留仙大道2號匯聚創(chuàng)新園2棟2605
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種用于甲基化擴(kuò)增子測序的建庫方法,涉及分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,所述建庫方法包括以下步驟:1)第一次PCR擴(kuò)增;2)一次磁珠純化;3)補(bǔ)平修復(fù);4)接頭連接;5)二次磁珠純化;6)第二次PCR擴(kuò)增;7)三次磁珠純化。為了解決傳統(tǒng)靶向甲基化測序中的測序文庫的構(gòu)建費用過高和周期過長的問題,本發(fā)明通過利用特異性引物對重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化過后的DNA進(jìn)行多重PCR反應(yīng)得到靶向的擴(kuò)增子,然后利用連接反應(yīng)將NGS測序用到的接頭加至擴(kuò)增子兩端純化回收形成測序文庫,有利于實現(xiàn)靶向甲基化測序,減低了測序文庫的構(gòu)建費用和周期,具有廣闊的市場前景。??