一種干細胞高密度培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010925617.X 申請日 -
公開(公告)號 CN112029707A 公開(公告)日 2020-12-04
申請公布號 CN112029707A 申請公布日 2020-12-04
分類號 C12N5/074 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 牟浩;郭巧;王熙凱 申請(專利權(quán))人 中康再生醫(yī)學科技(海南)有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 570000 海南省海口市秀英區(qū)南海大道226號??趪腋咝聟^(qū)創(chuàng)業(yè)孵化中心A樓5層A9-5室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及細胞培養(yǎng)領域,具體涉及一種可以促進干細胞增殖、避免細胞老化的干細胞高密度培養(yǎng)方法,包括以下步驟:S1,采用質(zhì)量濃度為0.3?0.5%的包被液包被培養(yǎng)皿;S2,在培養(yǎng)皿中加入培養(yǎng)基,并在濕度95%、5%CO2的培養(yǎng)箱中于37℃溫育平衡30分鐘,所述培養(yǎng)基由基礎培養(yǎng)基和添加劑組成,所述基礎培養(yǎng)基為10%FBS的DMEM/F12的培養(yǎng)液,所述添加劑為:轉(zhuǎn)鐵蛋白、成纖維細胞生長因子、谷氨酰胺;S3,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH至7.0,在培養(yǎng)皿中接種預先處理后的干細胞,放置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)3?5天,期間每需要24小時更換一次培養(yǎng)基。本發(fā)明所述的培養(yǎng)方法通過培養(yǎng)基的選擇以及培養(yǎng)步驟的優(yōu)化,可以大幅度提高干細胞的擴增效率。