一種熱穩(wěn)定性改良的木聚糖酶xyn-LVK及其基因

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510741237.X 申請日 -
公開(公告)號 CN106676086B 公開(公告)日 2019-07-16
申請公布號 CN106676086B 申請公布日 2019-07-16
分類號 C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/11;C12R1/84 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王劍英;郭宏濤;白孟飛;吳亞寧;譚福建 申請(專利權)人 深圳市愛格麗生態(tài)技術有限公司
代理機構 深圳市萬商天勤知識產權事務所(普通合伙) 代理人 安徽綠微康生物科技有限公司
地址 247099 安徽省池州市經濟技術開發(fā)區(qū)雙龍路1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種熱穩(wěn)定性改良的木聚糖酶xyn?LVK,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明通過理性設計,在木聚糖酶xyn?CDBFV的N端結構域和催化中心之間設計引入7位/217位和11位/45位二硫鍵,即得到重組木聚糖酶xyn?LVK,在xyn?LVK中,N端結構域和催化中心之間有三個二硫鍵,它們使N端結構域這個“夾子”更穩(wěn)固的夾住催化中心,使突變酶在高溫下更加穩(wěn)定。將xyn?LVK在畢赤酵母中表達后,與木聚糖酶xyn?CDBFV相比,突變后的酶的熱穩(wěn)定性得到了明顯的提高,在90℃處理4min還能保留65%的酶活,處理8min后還有42%的剩余酶活性。