間日瘧原蟲醛縮酶蛋白單克隆抗體的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201210165773.6 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN102690351B 公開（公告）日 2014-07-16
申請(qǐng)公布號(hào) CN102690351B 申請(qǐng)公布日 2014-07-16
分類號(hào) C07K16/40(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 陳東;張海燕;龐醒華 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 杭州傲銳生物醫(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 浙江杭州金通專利事務(wù)所有限公司 代理人 杭州傲銳生物醫(yī)藥科技有限公司;杭州奧泰生物技術(shù)股份有限公司
地址 311121 浙江省杭州市余杭區(qū)文一西路1500號(hào)1號(hào)樓209室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種間日瘧醛縮酶（aldolase）蛋白單克隆抗體的制備方法，該抗體是針對(duì)以aldolase蛋白為靶抗原，選擇A、B、C三個(gè)優(yōu)勢(shì)抗原表位，通過柔性片段連接A、B、C三個(gè)優(yōu)勢(shì)抗原表位，形成重組子D，并在其上下游分別添加BamHI和XhoI限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)，雙酶切后插入載體PET-28a(+)載體中，構(gòu)建重組蛋白D表達(dá)載體，利用大腸桿菌BL21表達(dá)重組蛋白D，免疫Balb/c小鼠，取其脾臟細(xì)胞與sp2/0骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到10株穩(wěn)定分泌aldolase蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。本發(fā)明所得單克隆抗體能特異性識(shí)別間日瘧原蟲aldolase蛋白，可用于間日瘧感染的特異性檢測(cè)，特異性高，反應(yīng)靈敏，實(shí)驗(yàn)成本低，適合高通量快速檢測(cè)。