一種拉鏈?zhǔn)娇裳由焯结樤赾fDNA文庫構(gòu)建中的應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910094209.1 申請日 -
公開（公告）號 CN109797196A 公開（公告）日 2019-05-24
申請公布號 CN109797196A 申請公布日 2019-05-24
分類號 C12Q1/6806（2018.01）I; C40B50/06（2006.01）I; C12N15/01（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 余越美; 蔡萬世; 孫永樂 申請（專利權(quán)）人 艾吉泰康生物科技（北京）有限公司
代理機構(gòu) 北京匯知杰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 艾吉泰康生物科技（北京）有限公司
地址 102206 北京市昌平區(qū)中關(guān)村生命科學(xué)園生命園路8號院一區(qū)6號樓507
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種使用拉鏈?zhǔn)娇裳由焯结樀腸fDNA文庫構(gòu)建方法，包括：獲得拉鏈?zhǔn)教结?，?’端包括與目標(biāo)DNA單鏈互補配對的15?20個堿基，5’端包括頸環(huán)結(jié)構(gòu)，所述頸環(huán)結(jié)構(gòu)中互補配對的堿基數(shù)目為18?50個，所述頸環(huán)結(jié)構(gòu)的環(huán)部從5’?3’方向包括A和U堿基；將DNA樣品打斷成片段，變性成單鏈DNA；所述拉鏈?zhǔn)教结樑c變性后的單鏈DNA進行連接反應(yīng)，然后進行延伸并在延伸鏈的3’端加上A，形成末端封閉的雙鏈DNA復(fù)合物；在進行剪切，形成平末端3’都帶有A的雙鏈DNA；將所述雙鏈DNA與接頭連接；對所述連接接頭的雙鏈DNA進行探針捕獲；對所述捕獲序列進行測序，獲得捕獲序列的測序結(jié)果。