PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其構建方法、應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011014743.6 申請日 -
公開（公告）號 CN112111015B 公開（公告）日 2021-12-07
申請公布號 CN112111015B 申請公布日 2021-12-07
分類號 C07K19/00（2006.01）I;C12N15/62（2006.01）I;C12N15/85（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;G01N33/68（2006.01）I 分類 有機化學〔2〕;
發(fā)明人 秦楓;蔣洪嬌;周志瓊;顏松;張小飛;周玥;黃敬雙;張偉;萬文琴;鮮靜;吳斌 申請（專利權）人 四川攜光生物技術有限公司
代理機構 成都行之專利代理事務所（普通合伙） 代理人 唐邦英
地址 215000 江蘇省蘇州市中國（江蘇）自由貿(mào)易試驗區(qū)蘇州片區(qū)蘇州工業(yè)園區(qū)新平街388號21幢7層01單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白及其構建方法、應用，構建方法包括以下步驟：S1、依次連接PLA2R、THSD7A、C1q核苷酸序列獲得目的基因，C1q重復三次，PLA2R、THSD7A之間加入Linker序列，THSD7A、C1q之間加入Linker序列，相鄰C1q之間加入Linker序列；S2、在目的基因前加入真核KOZAK序列，在上游加入限制性核酸內(nèi)切酶位點BamⅠ，在下游加入NotⅠ酶切位點，C端加入6*His標簽序列，根據(jù)哺乳細胞偏好設計全序列基因；S3、將步驟S2獲得的全序列基因與質(zhì)粒進行雙酶切獲得酶切產(chǎn)物；S4、將步驟S3獲得的酶切產(chǎn)物通過T4連接酶連接，獲得重組質(zhì)粒；S5、將重組質(zhì)粒在哺乳細胞中表達獲得PLA2R、C1q、THSD7A融合蛋白。通過本發(fā)明所述方法構建的融合蛋白能提高檢測試劑盒的靈敏度和特異性，減少漏檢和錯檢。