一種高通量檢測(cè)探針及其熔解曲線檢測(cè)方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910796967.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110438124A 公開（公告）日 2019-11-12
申請(qǐng)公布號(hào) CN110438124A 申請(qǐng)公布日 2019-11-12
分類號(hào) C12N15/11（2006.01）I; C12Q1/70（2006.01）I; C12Q1/6858（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊芳梅; 盧德景; 徐紅梅 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 合肥歐創(chuàng)基因生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州裕陽聯(lián)合專利代理有限公司 代理人 合肥歐創(chuàng)基因生物科技有限公司
地址 230000 安徽省合肥市蜀山區(qū)高新區(qū)創(chuàng)新大道106號(hào)明珠產(chǎn)業(yè)園3#5層D區(qū)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高通量檢測(cè)探針及其熔解曲線檢測(cè)方法及其應(yīng)用，本發(fā)明的探針在擴(kuò)增階段形成類似發(fā)卡結(jié)構(gòu)的分子信標(biāo)探針，該探針利用多個(gè)G堿基對(duì)探針的熒光進(jìn)行淬滅，在后續(xù)的熔解程序段，該探針與靶核酸發(fā)生熔解，根據(jù)探針的5’尾巴序列的堿基組成或在擴(kuò)增子下游區(qū)域的延伸長(zhǎng)度調(diào)節(jié)Tm值，探針可使用多色熒光基團(tuán)標(biāo)記，利用多通道從而達(dá)到更高通量的檢測(cè)目的，單個(gè)通道至少檢測(cè)8個(gè)靶核酸；檢測(cè)探針在第一輪擴(kuò)增時(shí)，其靶序列特異性結(jié)合序列Ⅰ與靶核酸特異結(jié)合，此時(shí)靶序列特異性結(jié)合序列Ⅱ被酶切，形成第二輪延伸的引物，通過兩次特異性結(jié)合，增強(qiáng)了檢測(cè)特異性，形成更窄的熔解峰，提高了通道利用效率，也同時(shí)提高了檢測(cè)靈敏度。