高效分泌表達(dá)豬瘟E2蛋白的CHO細(xì)胞株的培養(yǎng)方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710687334.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN107974432B 公開(公告)日 2021-04-23
申請(qǐng)公布號(hào) CN107974432B 申請(qǐng)公布日 2021-04-23
分類號(hào) C12N5/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 錢泓;吳有強(qiáng);卞廣林;吳素芳;車影;查銀河 申請(qǐng)(專利權(quán))人 浙江海隆生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京乾誠五洲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 代理人 付曉青;李廣文
地址 312000浙江省紹興市濱海新城馬歡路398號(hào)科創(chuàng)中心2號(hào)樓5樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高效分泌表達(dá)豬瘟E2蛋白的CHO細(xì)胞株的培養(yǎng)方法及其應(yīng)用,所述的培養(yǎng)方法包括以下步驟:1)將高效分泌表達(dá)豬瘟E2蛋白的CHO細(xì)胞株在1號(hào)培養(yǎng)基中逐級(jí)放大培養(yǎng);2)將放大培養(yǎng)后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入生物反應(yīng)器中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),在2號(hào)培養(yǎng)基中進(jìn)行攪拌培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)初期培養(yǎng)溫度為36.5~37.5℃,pH為7.05~7.25,從發(fā)酵培養(yǎng)的120±2h開始,將培養(yǎng)溫度下調(diào)至31.5~32.5℃,并將pH下調(diào)至6.90~7.10;在整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)的過程中,控制溶氧為20%~60%;在生物反應(yīng)器中發(fā)酵的第12天后,收獲細(xì)胞發(fā)酵液。本發(fā)明的培養(yǎng)方法獲得的豬瘟E2蛋白產(chǎn)高、且具有更好的可操作性和實(shí)用性,因此,本發(fā)明更有利于擴(kuò)大培養(yǎng)規(guī)模。??