一種包含重疊開(kāi)放閱讀框的基因的表達(dá)盒及其在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111425804.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN114150021A 公開(kāi)（公告）日 2022-03-08
申請(qǐng)公布號(hào) CN114150021A 申請(qǐng)公布日 2022-03-08
分類號(hào) C12N15/866（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12N15/35（2006.01）I;C07K14/015（2006.01）I;C12N7/00（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 勁帆生物醫(yī)藥科技（武漢）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢華之喻知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 彭翠;曹葆青
地址 430223 湖北省武漢市東湖新技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)光谷七路128號(hào)核磁波譜儀產(chǎn)業(yè)基地實(shí)驗(yàn)樓311-22（自貿(mào)區(qū)武漢片區(qū)）
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于基因工程領(lǐng)域，公開(kāi)一種包含重疊開(kāi)放閱讀框的基因的表達(dá)盒及其在昆蟲(chóng)細(xì)胞中的應(yīng)用，該表達(dá)盒包含從5’至3’的、可操作連接的：能夠在昆蟲(chóng)細(xì)胞中驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)子；人工構(gòu)建序列；僅缺少第一個(gè)翻譯起始密碼子的重疊開(kāi)放閱讀框；其中，人工構(gòu)建序列包含在昆蟲(chóng)細(xì)胞中有剪接活性的第一內(nèi)含子和第二內(nèi)含子，第一內(nèi)含子和第二內(nèi)含子共用5’部分或3’部分，人工構(gòu)建序列中不含翻譯起始密碼子；在轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程中，通過(guò)第一內(nèi)含子和第二內(nèi)含子的選擇性剪接作用，能夠形成翻譯起始密碼子AUG。本發(fā)明利用內(nèi)含子選擇性剪接作用，調(diào)控不同衣殼蛋白以及不同Rep蛋白的相對(duì)表達(dá)，可在昆蟲(chóng)細(xì)胞中大規(guī)模生產(chǎn)具有高包裝率和感染性的rAAV。