判斷PCR結(jié)果是否為假陽(yáng)性的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201711498072.3 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN108085371B 公開(公告)日 2021-11-02
申請(qǐng)公布號(hào) CN108085371B 申請(qǐng)公布日 2021-11-02
分類號(hào) C12Q1/6848(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李陽(yáng) 申請(qǐng)(專利權(quán))人 武漢艾德士生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 董建林;徐瑛
地址 430000湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新大道666號(hào)武漢國(guó)家生物產(chǎn)業(yè)基地項(xiàng)目B、C、D區(qū)研發(fā)大樓B1棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種判斷PCR結(jié)果是否為假陽(yáng)性的方法,先估算出在PCR體系內(nèi)將要加入的目標(biāo)基因模板分子數(shù)量;然后根據(jù)目標(biāo)基因模板分子數(shù)量向PCR體系內(nèi)添加內(nèi)參模板,所述內(nèi)參模板的分子數(shù)量控制在目標(biāo)基因模板分子數(shù)量的1/n;所述內(nèi)參模板和目標(biāo)基因模板高度同源,使得PCR引物能夠以相同效率擴(kuò)增內(nèi)參模板和目標(biāo)基因模板,然后對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行測(cè)序分析;當(dāng)擴(kuò)增結(jié)果以目標(biāo)基因片段為主,說(shuō)明樣品為陽(yáng)性;當(dāng)擴(kuò)增結(jié)果以內(nèi)參模板為主,則說(shuō)明樣品為陰性。本發(fā)明根據(jù)目標(biāo)基因模板分子數(shù)量加入適量的內(nèi)參模板,一方面能夠壓制污染信號(hào),其抗污染能力可以達(dá)到Southern blot的級(jí)別,另一方面,本發(fā)明通過(guò)簡(jiǎn)單的PCR技術(shù)就可以對(duì)轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性進(jìn)行鑒定,可信度高,成本低廉。