一種簡(jiǎn)單快速評(píng)估分子克隆體系效率的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201711482280.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN107941887B 公開(kāi)（公告）日 2020-07-10
申請(qǐng)公布號(hào) CN107941887B 申請(qǐng)公布日 2020-07-10
分類號(hào) G01N27/447 分類 測(cè)量；測(cè)試;
發(fā)明人 李陽(yáng) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢艾德士生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京縱橫知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 董建林;徐瑛
地址 438600 湖北省黃岡市黃州區(qū)新港北路19號(hào)黃岡光谷聯(lián)合科技城C9幢1-2層101-104號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)一種簡(jiǎn)單快速評(píng)估分子克隆體系效率的方法，設(shè)計(jì)一DNA片段，其上設(shè)置至少2個(gè)多克隆位點(diǎn)，所述多克隆位點(diǎn)內(nèi)有待測(cè)限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，且所述酶切位點(diǎn)只存在于所述多克隆位點(diǎn)上；同一內(nèi)切酶在不同的所述多克隆位點(diǎn)內(nèi)產(chǎn)生的粘性末端能夠互補(bǔ)連接；對(duì)所述DNA片段酶切，將上述酶切產(chǎn)物經(jīng)過(guò)連接酶連接后進(jìn)行電泳，對(duì)形成的電泳條帶進(jìn)行分析：當(dāng)電泳條帶以較大片段或單一的完整載體片段存在，說(shuō)明內(nèi)切酶活性比較低或者沒(méi)有活性；當(dāng)電泳條帶以較小片段存在，說(shuō)明連接酶活性較低或者沒(méi)有活性。提供了一種評(píng)估分子克隆體系效率的方法，可以簡(jiǎn)單快速的測(cè)試酶切連接體系中的主要成分(內(nèi)切酶或者連接酶)的活性。