一種雙sgRNA無痕基因編輯質(zhì)粒及其制備方法和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010525391.4 申請日 -
公開（公告）號 CN111621512A 公開（公告）日 2020-09-04
申請公布號 CN111621512A 申請公布日 2020-09-04
分類號 C12N15/81(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;程倩;王梓旭;陶小倩;楊平;柳偉強(qiáng);邢妍婧;趙一凡 申請（專利權(quán)）人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園C20棟
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種雙sgRNA無痕基因編輯質(zhì)粒及其制備方法和應(yīng)用，所述質(zhì)粒包括Cas9蛋白表達(dá)框和雙sgRNA表達(dá)框；所述雙sgRNA包括宿主基因編輯sgRNA和質(zhì)?；蚓庉媠gRNA。本發(fā)明設(shè)計(jì)含有雙sgRNA的質(zhì)粒對宿主進(jìn)行基因編輯，所述雙sgRNA的其中一條sgRNA用于對宿主進(jìn)行基因編輯，另一條sgRNA用于消除質(zhì)粒，實(shí)現(xiàn)了在對宿主進(jìn)行基因編輯的同時(shí)消除基因編輯質(zhì)粒的目的，不會(huì)因Cas9蛋白的持續(xù)表達(dá)而提高脫靶率，也不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入釀酒酵母進(jìn)行基因編輯，顯著提高了釀酒酵母無痕編輯的效率。??