一種質粒構建試劑盒、質粒構建方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911380365.0 申請日 -
公開（公告）號 CN110982834A 公開（公告）日 2020-04-10
申請公布號 CN110982834A 申請公布日 2020-04-10
分類號 C12N15/70;C12N15/64 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;楊平;孫健;柳偉強;劉敏祥;嚴成麗;邢妍婧;趙一凡 申請（專利權）人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機構 北京品源專利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園C20樓101單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種質粒構建試劑盒、質粒構建方法及其應用，所述試劑盒包括待組裝的DNA片段Fn和載體；所述載體包括中間載體和/或組裝載體；所述試劑盒還包括大腸桿菌，所述大腸桿菌含有λ噬菌體Red重組系統(tǒng)的質粒。本發(fā)明采用體外組裝和體內組裝相結合的方式，首先采用重組酶體系將大片段DNA與組裝載體在體外進行組裝，再將體外組裝產物轉化入含有λ噬菌體Red重組系統(tǒng)質粒的大腸桿菌中進行體內組裝，構建的試劑盒結合了體外組裝和體內組裝的優(yōu)點，并采用λ噬菌體Red重組系統(tǒng)增強大腸桿菌的體內組裝能力，加快了質粒合成速率，顯著提高了質粒的合成成功率。