一種多片段DNA組裝試劑盒、多片段DNA組裝方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911382965.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN110964738A 公開(kāi)(公告)日 2020-04-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN110964738A 申請(qǐng)公布日 2020-04-07
分類號(hào) C12N15/81;C12N15/66;C12R1/865 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 朱佑民;楊平;孫健;柳偉強(qiáng);劉敏祥;嚴(yán)成麗;邢妍婧;趙一凡 申請(qǐng)(專利權(quán))人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 蘇州泓迅生物科技股份有限公司
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)生物納米園C20樓101單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種多片段DNA組裝試劑盒、多片段DNA組裝方法及其應(yīng)用,所述試劑盒包括待組裝的DNA片段Fn和載體;所述載體包括中間連接載體和/或組裝載體;所述試劑盒還包括釀酒酵母菌。本發(fā)明采用體外組裝和體內(nèi)組裝相結(jié)合的方式,首先通過(guò)PCR合成初始片段并加入中間連接載體中,隨后采用重組酶體系將大片段DNA與組裝載體在體外進(jìn)行組裝,再將體外組裝產(chǎn)物轉(zhuǎn)化入釀酒酵母菌進(jìn)行體內(nèi)組裝,結(jié)合了體外組裝和體內(nèi)組裝的優(yōu)點(diǎn),顯著提高了超大質(zhì)粒的合成成功率。