一種篩選酶切適配融合蛋白的方法及IGF-I制備方法
基本信息
| 申請?zhí)?/td> | CN202010952359.4 | 申請日 | - |
| 公開（公告）號 | CN112111504A | 公開（公告）日 | 2020-12-22 |
| 申請公布號 | CN112111504A | 申請公布日 | 2020-12-22 |
| 分類號 | C12N15/62(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 湯華東;李冠霖;柳余莉;歐陽聰;楊薇;高思偲;尹領(lǐng)鵬;謝倩;楊琴霞;張盼盼 | 申請（專利權(quán)）人 | 武漢海特生物制藥股份有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 徐瑛 |
| 地址 | 430056湖北省武漢市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)海特科技園（珠山湖大道66號） | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種篩選酶切適配融合蛋白的方法及IGF?I制備方法，該篩選方法是將目標(biāo)蛋白序列編碼基因分別插入到多個(gè)不同的含蛋白酶酶切位點(diǎn)的表達(dá)載體中，獲得多個(gè)不同融合蛋白的氨基酸序列；所得融合蛋白的氨基酸序列進(jìn)行二級結(jié)構(gòu)預(yù)測；將不同融合蛋白氨基酸序列及其對應(yīng)的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果作為輸入文件，預(yù)測三維結(jié)構(gòu)；三維結(jié)構(gòu)預(yù)測結(jié)果與該融合蛋白相對應(yīng)的蛋白酶采用Cluspro算法進(jìn)行分子對接，選擇對接結(jié)果正確比例超過閾值的酶切體系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，篩選出蛋白酶最適配的融合蛋白。通過上述方法篩選出適用于IGF?I的凝血酶和HRV 3C蛋白酶可溶表達(dá)體系，具有穩(wěn)定、可溶、高活性大量表達(dá)、酶切方便等優(yōu)點(diǎn)。?? |
