一種質(zhì)粒提取試劑盒及提取方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011179658.5 申請日 -
公開(公告)號 CN112322612A 公開(公告)日 2021-02-05
申請公布號 CN112322612A 申請公布日 2021-02-05
分類號 C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 孫益軍;張峰;王雪根;李陽;韓斌 申請(專利權(quán))人 江蘇凱基生物技術(shù)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 江蘇圣典律師事務(wù)所 代理人 肖明芳
地址 210008江蘇省南京市江寧區(qū)江寧科學(xué)院芝蘭路18號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高純度質(zhì)粒提取試劑盒,其包括S I緩沖液、S II緩沖液、S III緩沖液、PS清洗液、洗脫緩沖液、TE 緩沖液以及新型離心柱,其中,S I緩沖液為1 M Tris?HCl,0.5 M EDTA和1 M 葡萄糖,PH=8.0;S II緩沖液為2 M NaOH和10% SDS;S III緩沖液為3 M乙酸鉀、2M鹽酸胍和2M乙酸,PH=3.6?4.2;PS清洗液為包含5?10% TritonX?114的異丙醇溶液;洗脫緩沖液為75%乙醇。本發(fā)明進(jìn)一步提出了利用該試劑盒大量提取質(zhì)粒的方法。本發(fā)明通過將新型離心柱與經(jīng)典的強(qiáng)堿?SDS裂解細(xì)菌細(xì)胞法結(jié)合起來使質(zhì)粒DNA樣品通過離心結(jié)合到純化柱上,在一定條件下又能將質(zhì)粒DNA充分洗脫,從而實現(xiàn)質(zhì)粒的快速純化,整個過程無需酚氯仿抽提,可以獲得高純度質(zhì)粒DNA,可滿足真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的使用。??