一種人蛻膜MDSCs的分離方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202210100915.4 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN114574438A 公開(kāi)（公告）日 2022-06-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN114574438A 申請(qǐng)公布日 2022-06-03
分類號(hào) C12N5/078（2010.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡雪梅;戚厚寶;李元燾;王玉 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 濱州醫(yī)學(xué)院
代理機(jī)構(gòu) 北京和聯(lián)順知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 -
地址 256603山東省濱州市濱城區(qū)黃河三路522號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種人蛻膜MDSCs的分離方法，該分離方法包括步驟：蛻膜組織采集、蛻膜組織進(jìn)一步清洗、剪碎、消化、終止消化、過(guò)濾、單個(gè)核細(xì)胞獲得、細(xì)胞貼壁、收集未貼壁細(xì)胞、MDSCs分離和流式檢測(cè)。本發(fā)明使用較溫和的Ⅳ型膠原酶進(jìn)行原代消化分離，與胰酶相比，膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用，避免了胰酶消化時(shí)對(duì)細(xì)胞膜蛋白的破壞作用；消化過(guò)程中加入I型DNA酶防止DNA導(dǎo)致的細(xì)胞凝集，且對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷；通過(guò)使用CD33磁珠分選獲得高純度的CD33+MDSCs，與流式分選相比，磁珠分選可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量高純度的細(xì)胞，操作簡(jiǎn)單，避免長(zhǎng)時(shí)間操作對(duì)細(xì)胞活性的影響和污染幾率的增加。