一種人ATP7b基因外顯子PCR擴(kuò)增系統(tǒng)、檢測試劑盒及其應(yīng)用的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810619125.0 申請日 -
公開（公告）號 CN108841929B 公開（公告）日 2022-03-11
申請公布號 CN108841929B 申請公布日 2022-03-11
分類號 C12Q1/6858（2018.01）I;C12Q1/6883（2018.01）I;CN 104830966 A,2015.08.12;CN 106011302 A,2016.10.12 楊華榮.肝豆?fàn)詈俗冃缘倪z傳學(xué)研究.《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 醫(yī)藥衛(wèi)生科技輯》.2012,E070-46.;陳冬梅.Wilson病患兒ATP7B基因外顯子突變研究.《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 醫(yī)藥衛(wèi)生科技輯》.2010,E070-11.;Slavka Vrabelova等.Mutation analysis of the ATP7B gene and genotype/phenotype correlation in 227 patients with Wilson disease.《Molecular Genetics and Metabolism》.2005,第86卷（第2005期）,第277–285頁. 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 彭朝敏;金云舟;周巍;陳林;李明陽;鄧淑燕 申請（專利權(quán)）人 上海五色石醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海上谷知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 蔡繼清
地址 201407 上海市奉賢區(qū)沿錢公路5599號21942室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于人核酸體外檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體為人ATP7b基因的PCR擴(kuò)增檢測系統(tǒng)及其應(yīng)用。PCR擴(kuò)增檢測系統(tǒng)包括：引物組、PCR反應(yīng)母液容器及Sanger Sequencing后的序列分析；引物組容器包含引物SEQ ID No.1～SEQ ID No.42貯存液。本發(fā)明在DNA提取情況后（DNA質(zhì)量滿足要求：1.6≤OD260/OD280≤2.0，DNA最低濃度≥10.0ng/μL），通過PCR反應(yīng)對人ATP7b基因21個外顯子目的片段同時擴(kuò)增，通過目的片段的瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行ATP7b基因外顯子有無缺失突變的判斷，進(jìn)而進(jìn)行電泳凝膠DNA的回收純化進(jìn)行一代測序，通過測序片段的基因序列與Reference Sequence（權(quán)威數(shù)據(jù)庫中參考序列）進(jìn)行比對，最終進(jìn)行目標(biāo)序列中有無單堿基突變的判斷，以期對人ATP7b基因全部外顯子進(jìn)行金標(biāo)準(zhǔn)方法探討分析肝豆?fàn)詈俗冃栽诜肿舆z傳水平上的發(fā)病原因。而且，本方法操作簡單，使用儀器設(shè)備普及度很高，適合推廣使用。