一種分子標簽的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610496676.3 申請日 -
公開（公告）號 CN106119356A 公開（公告）日 2019-09-24
申請公布號 CN106119356A 申請公布日 2019-09-24
分類號 C12Q1/68 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王海龍;胡妮;徐健;唐元華 申請（專利權）人 蘇州首度基因科技有限責任公司
代理機構 蘇州市中南偉業(yè)知識產(chǎn)權代理事務所（普通合伙） 代理人 馮瑞
地址 215123 江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園A3-118
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種分子標簽的制備方法，包括以下步驟：在DNA分子模板的5′接頭端引入barcode序列；用DNA聚合酶延伸3′接頭端，與barcode序列互補，得到補齊序列；向補齊序列中加入DNA聚合酶，在補齊序列的3′接頭端引入胸腺嘧啶，得到改造的接頭；將待測DNA破碎成DNA短片段，用DNA連接酶連接DNA短片段與改造的接頭，得到DNA連接產(chǎn)物；聚合酶鏈式反應擴增DNA連接產(chǎn)物，得到擴增產(chǎn)物；對擴增產(chǎn)物進行測序，然后比對到人類參考基因組，在多個DNA模板副本中選取堿基錯誤率最低的DNA序列，即為分子標簽。該分子標簽技術通過改變barcode長度，去除固定序列，減少測序中數(shù)據(jù)的浪費，提高了反應速率，能有效區(qū)分DNA擴增過程中的錯誤和真實的DNA變異。